Produkte

Beskrywing:tanshinone I is 'n tipe IIA menslike rekombinante sPLA2 en Rabbit Recombinant cPLA2 inhibeerder met IC50 van onderskeidelik 11 μ M en 82 μ M.

Verwante kategorieë:seinweë > > metaboliese ensieme /
proteases > > fosfolipiede
Navorsingsveld > > kardiovaskulêre siekte
Natuurlike Produkte > > Kinone

Teiken:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro studie:tanshinone I het die vorming van PGE2 deur LPS-geïnduseerde rou makrofage geïnhibeer (IC50 = 38 μ M）。 Wanneer tanshinone I en LPS terselfdertyd bygevoeg is, het die verbinding 10-100 μ PGE2-produksie van M (IC50 = 38 μ M) aansienlik geïnhibeer ）。 Wanneer tanshinoon bygevoeg na volledige induksie van COX-2, het tanshinone I ook die produksie van PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 verminder. Die feit dat tanshinone I PGE 2-produksie inhibeer deur vooraf geïnduseerde COX-2, dui sterk daarop dat die verbinding kan COX-2-aktiwiteit direk inhibeer en/of PLA2-aktiwiteit beïnvloed. Wanneer tanshinone I met twee verskillende vorme van fosfolipase A2 (PLA2) geïnkubeer is, het dit sPLA2 aansienlik geïnhibeer op 'n konsentrasie-afhanklike wyse (IC50 = 11) μM). Ten spyte van die lae sterkte, tanshinone I het ook cPLA2 (IC50 = 82) μM）[1] geïnhibeer

In vivo studie:tanshinone I het anti-inflammatoriese aktiwiteit getoon in karrageen-geïnduseerde poot-edeem en adjuvans-geïnduseerde artritis by rotte.Ten einde die anti-inflammatoriese aktiwiteit van tanshinone I vas te stel, is klassieke dieremodelle van akute en chroniese inflammasie [rat carrageenan (CGN)-geïnduseerde poot-edeem en rot-adjuvans-geïnduseerde artritis (AIA)] gebruik.Met orale tanshinoon I, het dit beduidende anti-inflammatoriese aktiwiteit teen CGN-geïnduseerde poot-edeem getoon (47% inhibisie by 160 mg / kg), terwyl die IC50 van indometasien 7.1 mg / kg was.In AIA het tanshinone I 27% inhibisie van sekondêre inflammasie op dag 18 gegee teen 'n orale dosis van 50 mg / kg / dag, terwyl prednisoloon (5 mg / kg / dag) effektiewe inhibisie (65%) getoon het [1]

Kinase-eksperiment:as die bron van PLA2, is menslike rekombinante sPLA2 (tipe IIA) gesuiwer van CHO-selle wat met PLA2-geen getransfekteer is, en konynrekombinante bloedplaatjie-cPLA2 is verkry deur die uitdrukking daarvan in baculovirus.Standaard reaksiemengsel (200) μ 50) Dit het 100 mm Tris HCl buffer (pH 9.0), 6 mM CaCl2 en 20 nmol 1-asiel - [1-14C] - arakidoniel Sn gliserolfosfaat etanolamien (2000 CPM / nmol) bevat.Of daar was geen tanshinone I nie. die reaksie is begin deur 50NG gesuiwerde sPLA2 of cPLA2 by te voeg.Na 20 minute by 37 ℃, is die vrye vetsure wat geproduseer is, ontleed.Onder hierdie standaardtoestande word ongeveer 10% vrye vetsure vrygestel van die bygevoegde fosfolipiedsubstraat in die reaksiemengsel sonder tanshinoon I [1].

Seleksperiment:rou 264.7 selle is gekweek met DMEM aangevul met 10% FBS en 1% antibiotika by 37 ℃ onder 5% CO2.Kortliks, selle is op 96-put plate (2) × 10 (5 selle / put) gesaai.Tensy anders aangedui, is LPS (1ug / ml) en tanshinone I bygevoeg en vir 24 uur geïnkubeer.Die PGE2-konsentrasie in die medium is gemeet met behulp van die EIA-stel vir PGE2.Ten einde die effek van tanshinone I op PGE 2 produksie na COX-2 induksie te bepaal, is selle vir 24 uur met LPS (1 μ G / ml) gemeng en deeglik gewas.Dan is tanshinone I sonder LPS bygevoeg en die selle is vir nog 24 uur gekweek.PGE2-konsentrasie is vanaf die medium gemeet.MTT-toets is gebruik om die sitotoksisiteit van tanshinone I op rou selle te ondersoek.Tanshinone I by 100 μM het geen sitotoksisiteit getoon nie [1].

Diere-eksperiment:Ten einde die inhiberende aktiwiteit van tanshinone I op akute en chroniese inflammatoriese dieremodelle te evalueer, is rotkarragenaan (CGN)-geïnduseerde poot-edeem en adjuvans-geïnduseerde artritis (AIA) modelle gebruik.Kortom, 1% CGN opgelos in pirogeenvrye sout (0.05 ml) is in die regter agterpoot van rotte ingespuit vir poot-edeemtoets.Na 5 uur is die swelling van die behandelde kloue met 'n plethysmograaf gemeet.Tanshinone I opgelos in 0,5% CMC is 1 uur voor CGN-inspuiting oraal toegedien.Vir die AIA-toets is artritiese ontsteking geïnduseer deur Mycobacterium lactis (0.6ml / rot) opgelos in minerale olie in die regteragterpoot van rotte in te spuit.Tanshinone Ek is elke dag mondelings toegedien.Die uitsetting van behandelde en onbehandelde kloue is gemeet met 'n plethysmograaf.

Verwysings:[1] Kim SY, et al.Effekte van Tanshinone I geïsoleer uit Salvia miltiorrhiza bunge op arakidonsuurmetabolisme en in vivo inflammatoriese response.Phytother Res.2002 Nov;16(7):616-20.