Продукти

Описание:таншинон I е тип IIA човешки рекомбинантен sPLA2 и заешки рекомбинантен cPLA2 инхибитор с IC50 съответно 11 μM и 82 μM.

Свързани категории:сигнални пътища >> метаболитни ензими /
протеази > > фосфолипиди
Изследователска област > > сърдечно-съдови заболявания
Природни продукти > > Хинони

Цел:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Ин витро изследване:таншинон I инхибира образуването на PGE2 от LPS индуцирани необработени макрофаги (IC50 = 38 μM）。 Когато таншинон I и LPS се добавят едновременно, съединението значително инхибира 10-100 μ PGE2 производството на M (IC50 = 38 μM ）。 Когато се добави след пълна индукция на COX-2, таншинон I също така намалява производството на PGE2 (IC50 = 46) μM）。 Фактът, че таншинон I инхибира производството на PGE 2 чрез предварително индуциран COX-2, силно предполага, че съединението може да директно инхибира активността на COX-2 и/или повлиява активността на PLA2. Когато таншинон I беше инкубиран с две различни форми на фосфолипаза А2 (PLA2), той значително инхибира sPLA2 по начин, зависим от концентрацията (IC50 = 11) μM). Въпреки ниското си съдържание ефикасност, таншинон I също инхибира cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Проучване in vivo:таншинон I показа противовъзпалителна активност при индуциран от карагенан оток на лапата и индуциран от адювант артрит при плъхове.За да се установи противовъзпалителната активност на таншинон I, са използвани класически животински модели на остро и хронично възпаление [плъх карагенан (CGN) - индуциран оток на лапата и плъх адювант индуциран артрит (AIA)].При орален прием на таншинон I, той показва значителна противовъзпалителна активност срещу индуциран от CGN оток на лапата (47% инхибиране при 160 mg/kg), докато IC50 на индометацин е 7,1 mg/kg.При AIA таншинон I дава 27% инхибиране на вторично възпаление на ден 18 при перорална доза от 50 mg/kg/ден, докато преднизолон (5 mg/kg/ден) показва ефективно инхибиране (65%) [1]

Експеримент с киназа:като източник на PLA2, човешки рекомбинантен sPLA2 (тип IIA) беше пречистен от СНО клетки, трансфектирани с PLA2 ген, и заешки рекомбинантен тромбоцитен cPLA2 беше получен чрез неговата експресия в бакуловирус.Стандартна реакционна смес (200) μ 50) Съдържа 100 mm Tris HCl буфер (рН 9,0), 6 mM CaCl2 и 20 nmol 1-ацил - [1-14C] - арахидонил Sn глицерол фосфат етаноламин (2000 CPM / nmol).Или нямаше таншинон I. реакцията беше стартирана чрез добавяне на 50NG пречистен sPLA2 или cPLA2.След 20 минути при 37 ℃, произведените свободни мастни киселини бяха анализирани.При тези стандартни условия около 10% свободни мастни киселини се освобождават от добавения фосфолипиден субстрат в реакционната смес без таншинон I [1].

Клетъчен експеримент:необработени 264.7 клетки се култивират с DMEM, допълнен с 10% FBS и 1% антибиотици при 37 ℃ под 5% CO2.Накратко, клетките се посяват върху 96-ямкови плаки (2) × 10 (5 клетки/ямка).Освен ако не е посочено друго, LPS (1ug/ml) и таншинон I бяха добавени и инкубирани за 24 часа.Концентрацията на PGE2 в средата се измерва с помощта на EIA комплект за PGE2.За да се определи ефектът на таншинон I върху производството на PGE 2 след индукция на COX-2, клетките се смесват с LPS (1 μG / ml) в продължение на 24 часа и се промиват старателно.След това се добавя таншинон I без LPS и клетките се култивират за още 24 часа.Концентрацията на PGE2 се измерва от средата.МТТ анализът беше използван за изследване на цитотоксичността на таншинон I върху сурови клетки.Таншинон I при 100 μM не показва никаква цитотоксичност [1].

Експеримент с животни:за да се оцени инхибиторната активност на таншинон I върху остри и хронични възпалителни животински модели, бяха използвани модели на индуциран от плъх карагенан (CGN) оток на лапата и адювантно индуциран артрит (AIA).Накратко, 1% CGN, разтворен в апирогенен физиологичен разтвор (0,05 ml), се инжектира в дясната задна лапа на плъхове за тест за оток на лапата.След 5 часа подуването на третираните нокти се измерва с помощта на плетизмограф.Таншинон I, разтворен в 0,5% CMC, се прилага перорално 1 час преди инжектирането на CGN.За AIA теста, артритно възпаление се индуцира чрез инжектиране на Mycobacterium lactis (0,6 ml/плъх), разтворен в минерално масло, в дясната задна лапа на плъхове.Таншинон ми се прилага перорално всеки ден.Разширяването на третирани и нетретирани нокти се измерва с помощта на плетизмограф.

Препратки:[1] Kim SY, et al.Ефекти на Tanshinone I, изолиран от Salvia miltiorrhiza bunge върху метаболизма на арахидоновата киселина и in vivo възпалителни реакции.Phytother Res.2002 ноември;16(7):616-20.