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विवरण:टैनशिनोन I एक प्रकार का IIA मानव पुनः संयोजक sPLA2 और खरगोश पुनः संयोजक cPLA2 अवरोधक है, जिसमें क्रमशः 11 का IC50 μ M और 82 μ M。 है।

संबंधित श्रेणियाँ:संकेतन पथ > > उपापचयी एंजाइम /
प्रोटीज > > फॉस्फोलिपिड्स
अनुसंधान क्षेत्र >> हृदय रोग
प्राकृतिक उत्पाद > > क्विनोन्स

लक्ष्य:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1]।

इन विट्रो स्टडी:tanshinone I ने LPS प्रेरित कच्चे मैक्रोफेज (IC50 = 38 μ M）。) द्वारा PGE2 के गठन को रोक दिया जब टैनशिनोन I और LPS को एक ही समय में जोड़ा गया, तो यौगिक ने M (IC50 = 38 μ M) के 10-100 μ PGE2 उत्पादन को महत्वपूर्ण रूप से बाधित कर दिया। जब COX-2 के पूर्ण प्रेरण के बाद जोड़ा जाता है, तो tanshinone I ने PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 का उत्पादन भी कम कर दिया है। तथ्य यह है कि टैनशिनोन I पूर्व प्रेरित COX-2 के माध्यम से PGE 2 उत्पादन को रोकता है, यह दृढ़ता से सुझाव देता है कि यौगिक कर सकता है सीधे COX-2 गतिविधि को रोकता है और / या PLA2 गतिविधि को प्रभावित करता है। जब टैनशिनोन I को फॉस्फोलिपेज़ A2 (PLA2) के दो अलग-अलग रूपों के साथ ऊष्मायन किया गया था, तो इसने sPLA2 को एक एकाग्रता निर्भर तरीके (IC50 = 11) μ M) में महत्वपूर्ण रूप से बाधित किया। इसके कम होने के बावजूद पोटेंसी, टैनशिनोन I ने cPLA2 (IC50 = 82) μ M） [1] को भी बाधित किया

विवो अध्ययन में:टैनशिनोन I ने चूहों में कैरेजेनन प्रेरित पंजा एडिमा और सहायक प्रेरित गठिया में विरोधी भड़काऊ गतिविधि दिखाई।टैनशिनोन I की विरोधी भड़काऊ गतिविधि को स्थापित करने के लिए, तीव्र और पुरानी सूजन के शास्त्रीय पशु मॉडल [चूहा कैरेजेनन (सीजीएन) - प्रेरित पंजा एडिमा और चूहा सहायक प्रेरित गठिया (एआईए)] का उपयोग किया गया था।जब मौखिक टैनशिनोन I, इसने CGN प्रेरित पंजा एडिमा (160 मिलीग्राम / किग्रा पर 47% निषेध) के खिलाफ महत्वपूर्ण विरोधी भड़काऊ गतिविधि दिखाई, जबकि इंडोमेथेसिन का IC50 7.1 मिलीग्राम / किग्रा था।एआईए में, टैनशिनोन I ने 18 दिन में 50 मिलीग्राम / किग्रा / दिन की मौखिक खुराक पर माध्यमिक सूजन का 27% निषेध दिया, जबकि प्रेडनिसोलोन (5 मिलीग्राम / किग्रा / दिन) ने प्रभावी निषेध (65%) दिखाया।

किनेज प्रयोग:PLA2 के स्रोत के रूप में, मानव पुनः संयोजक sPLA2 (प्रकार IIA) को PLA2 जीन के साथ ट्रांसफ़ेक्ट CHO कोशिकाओं से शुद्ध किया गया था, और खरगोश पुनः संयोजक प्लेटलेट cPLA2 को बैकोलोवायरस में इसकी अभिव्यक्ति के माध्यम से प्राप्त किया गया था।मानक प्रतिक्रिया मिश्रण (200) μ 50) इसमें 100 मिमी ट्रिस एचसीएल बफर (पीएच 9.0), 6 मिमी सीएसीएल 2 और 1-एसाइल के 20 एनएमओएल - [1-14 सी] - एराकिडोनिल एसएन ग्लिसरॉल फॉस्फेट इथेनॉलमाइन (2000 सीपीएम / एनएमओएल) शामिल थे।या कोई टैनशिनोन I नहीं था। 50NG शुद्ध sPLA2 या cPLA2 जोड़कर प्रतिक्रिया शुरू की गई थी।37 ℃ पर 20 मिनट के बाद, उत्पादित मुक्त फैटी एसिड का विश्लेषण किया गया।इन मानक स्थितियों के तहत, टैनशिनोन I [1] के बिना प्रतिक्रिया मिश्रण में जोड़े गए फॉस्फोलिपिड सब्सट्रेट से लगभग 10% मुक्त फैटी एसिड जारी किए जाते हैं।

सेल प्रयोग:कच्ची 264.7 कोशिकाओं को 5% सीओ के तहत 37 ℃ पर 10% FBS और 1% एंटीबायोटिक दवाओं के साथ DMEM के साथ सुसंस्कृत किया गया था।संक्षेप में, कोशिकाओं को 96 वेल प्लेट्स (2) × 10 (5 सेल / वेल) पर रखा गया था।जब तक अन्यथा संकेत न दिया गया हो, LPS (1ug / ml) और टैनशिनोन I को जोड़ा गया और 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया।माध्यम में PGE2 सांद्रता को PGE2 के लिए EIA किट का उपयोग करके मापा गया।COX-2 प्रेरण के बाद PGE 2 उत्पादन पर टैनशिनोन I के प्रभाव को निर्धारित करने के लिए, कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए LPS (1 μ G / ml) के साथ मिलाया गया और अच्छी तरह से धोया गया।फिर, तानशिनोन I को एलपीएस के बिना जोड़ा गया और कोशिकाओं को अगले 24 घंटों के लिए सुसंस्कृत किया गया।PGE2 सांद्रता को माध्यम से मापा गया।कच्चे कोशिकाओं पर टैनशिनोन I की साइटोटोक्सिसिटी की जांच के लिए एमटीटी परख का उपयोग किया गया था।100 μ M पर तानशिनोन I ने कोई साइटोटोक्सिसिटी [1] नहीं दिखाई।

पशु प्रयोग:तीव्र और पुरानी भड़काऊ पशु मॉडल पर टैनशिनोन I की निरोधात्मक गतिविधि का मूल्यांकन करने के लिए, चूहा कैरेजेनन (सीजीएन) - प्रेरित पंजा एडिमा और सहायक प्रेरित गठिया (एआईए) मॉडल का उपयोग किया गया था।संक्षेप में, पाइरोजेन मुक्त खारा (0.05 मिली) में घुलने वाले 1% सीजीएन को पंजा एडिमा परीक्षण के लिए चूहों के दाहिने पिछले पंजे में इंजेक्ट किया गया था।5 घंटे के बाद, प्लेथिस्मोग्राफ का उपयोग करके उपचारित पंजों की सूजन को मापा गया।टैनशिनोन I को 0.5% CMC में घोलकर CGN इंजेक्शन से 1 घंटे पहले मौखिक रूप से प्रशासित किया गया था।एआईए परीक्षण के लिए, चूहों के दाहिने हिंद पंजा में खनिज तेल में घुले माइकोबैक्टीरियम लैक्टिस (0.6 मिली / चूहा) को इंजेक्ट करके गठिया की सूजन को प्रेरित किया गया था।Tanshinone I को हर दिन मौखिक रूप से प्रशासित किया गया था।उपचारित और अनुपचारित पंजों के विस्तार को प्लेथिस्मोग्राफ का उपयोग करके मापा गया।

सन्दर्भ:[1] किम एसवाई, एट अल।टैनशिनोन I के प्रभाव एराकिडोनिक एसिड चयापचय पर और विवो भड़काऊ प्रतिक्रियाओं में साल्विया मिल्टियोरिरिजा बंज से अलग हो गए।फाइटोदर रेस।2002 नवंबर;16(7):616-20.