Производи

Опис:таншинон I е тип IIA човечки рекомбинантен sPLA2 и зајак рекомбинантен cPLA2 инхибитор со IC50 од 11, соодветно, μ M и 82 μ M.

Поврзани категории:сигнални патишта > > метаболички ензими /
протеази > > фосфолипиди
Истражувачко поле >> кардиоваскуларни болести
Природни производи > > Кинони

Цел:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Ин витро студија:таншинон I го инхибираше формирањето на PGE2 од страна на сурови макрофаги индуцирани од LPS (IC50 = 38 μ M）. Кога таншинон I и LPS беа додадени во исто време, соединението значително го инхибираше 10-100 μ PGE2 производството на M (IC50 = 38 μ M ）。 Кога се додава по целосна индукција на COX-2, таншинонот I исто така го намалува производството на PGE2 (IC50 = 46) μ M）. Фактот дека таншинонот I го инхибира производството на PGE 2 преку претходно индуцираниот COX-2 силно сугерира дека соединението може да директно ја инхибира активноста на COX-2 и/или влијае на активноста на PLA2. Кога таншинон I беше инкубиран со две различни форми на фосфолипаза А2 (PLA2), тој значително го инхибира sPLA2 на начин зависен од концентрацијата (IC50 = 11) μ M). потенција, таншинон I исто така го инхибирал cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Ин виво студија:таншинон I покажа антиинфламаторна активност кај едемот на шепата предизвикан од карагенан и артритисот предизвикан од адјуванс кај стаорци.Со цел да се утврди антиинфламаторната активност на таншинон I, користени се класични животински модели на акутно и хронично воспаление [стаорец карагенан (CGN) - индуциран едем на шепата и артритис индуциран со помош на стаорци (AIA)].При орален таншинон I, тој покажа значителна антиинфламаторна активност против едемот на шепата предизвикан од CGN (47% инхибиција на 160 mg / kg), додека IC50 на индометацин беше 7,1 mg / kg.Во АИА, таншинонот I дал 27% инхибиција на секундарното воспаление на ден 18 во орална доза од 50 mg/kg/ден, додека преднизолонот (5 mg/kg/ден) покажал ефикасна инхибиција (65%) [1]

Експеримент со киназа:како извор на PLA2, хуманиот рекомбинантен sPLA2 (тип IIA) беше прочистен од CHO-клетки трансфицирани со генот PLA2, а рекомбинантната тромбоцитна cPLA2 на зајаците беше добиена преку нејзината експресија во бакуловирус.Стандардна реакциона смеса (200) μ 50) Содржеше 100 mm Tris HCl пуфер (pH 9,0), 6 mM CaCl2 и 20 nmol 1-ацил - [1-14C] - арахидонил Sn глицерол фосфат етаноламин (2000 CPM / nn).Или немаше таншинон I. реакцијата започна со додавање на 50NG прочистен sPLA2 или cPLA2.По 20 минути на 37 ℃, произведените слободни масни киселини беа анализирани.Под овие стандардни услови, околу 10% од слободните масни киселини се ослободуваат од додадениот фосфолипиден супстрат во реакционата смеса без таншинон I [1].

Експеримент со клетки:сурови 264,7 клетки беа култивирани со DMEM дополнет со 10% FBS и 1% антибиотици на 37 ℃ под 5% CO2.Накратко, клетките беа засеани на плочи од 96 бунари (2) × 10 (5 клетки / бунар).Освен ако не е поинаку назначено, LPS (1ug/ml) и таншинон I беа додадени и инкубирани 24 часа.Концентрацијата на PGE2 во медиумот беше измерена со помош на комплетот EIA за PGE2.Со цел да се одреди ефектот на таншинон I врз производството на PGE 2 по индукцијата на COX-2, клетките беа измешани со LPS (1 μ G / ml) 24 часа и темелно се измија.Потоа, таншинон I беше додаден без LPS и клетките беа култивирани уште 24 часа.Концентрацијата на PGE2 беше измерена од медиумот.MTT анализата беше искористена за да се испита цитотоксичноста на таншинон I на сурови клетки.Таншинон I на 100 μ M не покажа никаква цитотоксичност [1].

Експеримент со животни:со цел да се оцени инхибиторната активност на таншинон I на акутни и хронични инфламаторни животински модели, беа користени модели на карагенан (CGN) - индуциран едем на шепата и адјувантно индуциран артритис (AIA).Накратко, 1% CGN растворен во солен раствор без пироген (0,05 ml) беше инјектиран во десната задна шепа на стаорци за тест за едем на шепата.По 5 часа, отокот на третираните канџи беше измерен со помош на плетизмограф.Таншинон I растворен во 0,5% CMC беше администриран орално 1 час пред инјектирањето на CGN.За тестот АИА, артритичното воспаление беше индуцирано со инјектирање на Mycobacterium lactis (0,6 ml/стаорец) растворен во минерално масло во десната задна шепа на стаорците.Таншинон ми се администрира орално секој ден.Проширувањето на третираните и нетретирани канџи беше измерено со помош на плетизмограф.

Референци:[1] Ким СЈ, и сор.Ефекти на Таншинон I изолиран од Salvia miltiorrhiza bunge врз метаболизмот на арахидонската киселина и ин виво инфламаторните реакции.Phytother Res.2002 ноември;16 (7): 616-20.