Προϊόντα

Περιγραφή:Η τανσινόνη Ι είναι ένας αναστολέας ανασυνδυασμένου sPLA2 ανθρώπου και ανασυνδυασμένου cPLA2 κουνελιού τύπου IIA με IC50 11 μ M και 82 μ M αντίστοιχα.

Σχετικές κατηγορίες:μονοπάτια σηματοδότησης > > μεταβολικά ένζυμα /
πρωτεάσες > > φωσφολιπίδια
Ερευνητικό πεδίο > > καρδιαγγειακά νοσήματα
Φυσικά Προϊόντα > > Κινόνες

Στόχος:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Μελέτη in vitro:η τανσινόνη I ανέστειλε τον σχηματισμό της PGE2 από ακατέργαστα μακροφάγα που επάγονται από LPS (IC50 = 38 μ M）. Όταν η τανσινόνη I και η LPS προστέθηκαν ταυτόχρονα, η ένωση ανέστειλε σημαντικά την παραγωγή M 10-100 μ PGE2 (IC50 = 38 μΜ ）。 Όταν προστέθηκε μετά την πλήρη επαγωγή της COX-2, η τανσινόνη I μείωσε επίσης την παραγωγή της PGE2 (IC50 = 46) μ M）. Το γεγονός ότι η τανσινόνη I αναστέλλει την παραγωγή PGE 2 μέσω της προεπαγόμενης COX-2 υποδηλώνει έντονα ότι η ένωση μπορεί να αναστέλλει άμεσα τη δραστηριότητα COX-2 ή/και επηρεάζει τη δραστηριότητα του PLA2. Όταν η τανσινόνη I επωάστηκε με δύο διαφορετικές μορφές φωσφολιπάσης Α2 (PLA2), ανέστειλε σημαντικά τη sPLA2 με τρόπο εξαρτώμενο από τη συγκέντρωση (IC50 = 11) μ M). ισχύς, η τανσινόνη I ανέστειλε επίσης το cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Μελέτη In Vivo:Η τανσινόνη Ι έδειξε αντιφλεγμονώδη δράση σε οίδημα ποδιού που προκαλείται από καραγενάνη και αρθρίτιδα που προκαλείται από επικουρικό σε αρουραίους.Προκειμένου να διαπιστωθεί η αντιφλεγμονώδης δράση της τανσινόνης Ι, χρησιμοποιήθηκαν κλασικά ζωικά μοντέλα οξείας και χρόνιας φλεγμονής [οίδημα ποδιού που προκαλείται από καραγενάνη (CGN) και αρθρίτιδα επαγόμενη από ανοσοενισχυτικό αρουραίου (ΑΙΑ)].Όταν χορηγήθηκε τανσινόνη Ι από το στόμα, έδειξε σημαντική αντιφλεγμονώδη δράση έναντι του οιδήματος του ποδιού που προκαλείται από CGN (47% αναστολή στα 160 mg/kg), ενώ η IC50 της ινδομεθακίνης ήταν 7,1 mg/kg.Στο AIA, η τανσινόνη I έδωσε 27% αναστολή της δευτερογενούς φλεγμονής την ημέρα 18 σε από του στόματος δόση 50 mg / kg / ημέρα, ενώ η πρεδνιζολόνη (5 mg / kg / ημέρα) έδειξε αποτελεσματική αναστολή (65%) [1]

Πείραμα κινάσης:Ως πηγή του PLA2, το ανθρώπινο ανασυνδυασμένο sPLA2 (τύπος ΙΙΑ) καθαρίστηκε από κύτταρα CHO επιμολυνθέντα με γονίδιο PLA2 και το ανασυνδυασμένο cPLA2 αιμοπεταλίων κουνελιού ελήφθη μέσω της έκφρασής του σε βακουλοϊό.Πρότυπο μίγμα αντίδρασης (200) μ 50) Περιείχε 100 mm ρυθμιστικό διάλυμα Tris HCl (pH 9,0), 6 mM CaCl2 και 20 nmol αιθανολαμίνης φωσφορικής γλυκερόλης 1-ακυλ - [1-14C] - αραχιδονυλ Sn (2000 CPM/pm).Ή δεν υπήρχε τανσινόνη Ι. η αντίδραση ξεκίνησε με την προσθήκη 50NG καθαρισμένου sPLA2 ή cPLA2.Μετά από 20 λεπτά στους 37 ℃, αναλύθηκαν τα παραγόμενα ελεύθερα λιπαρά οξέα.Κάτω από αυτές τις τυπικές συνθήκες, περίπου το 10% των ελεύθερων λιπαρών οξέων απελευθερώνεται από το προστιθέμενο φωσφολιπιδικό υπόστρωμα στο μίγμα της αντίδρασης χωρίς τανσινόνη Ι [1].

Πείραμα κυττάρων:ακατέργαστα κύτταρα 264,7 καλλιεργήθηκαν με DMEM συμπληρωμένο με 10% FBS και 1% αντιβιοτικά στους 37 ℃ υπό 5% CO2.Εν συντομία, τα κύτταρα σπάρθηκαν σε πλάκες 96 φρεατίων (2) χ 10 (5 κύτταρα/φρεάτιο).Εκτός εάν υποδεικνύεται διαφορετικά, προστέθηκαν LPS (1 μg/ml) και τανσινόνη Ι και επωάστηκαν για 24 ώρες.Η συγκέντρωση PGE2 στο μέσο μετρήθηκε χρησιμοποιώντας το κιτ EIA για PGE2.Προκειμένου να προσδιοριστεί η επίδραση της τανσινόνης I στην παραγωγή PGE 2 μετά την επαγωγή COX-2, τα κύτταρα αναμίχθηκαν με LPS (1 μ G / ml) για 24 ώρες και πλύθηκαν καλά.Στη συνέχεια, προστέθηκε tanshinone I χωρίς LPS και τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν για άλλες 24 ώρες.Η συγκέντρωση PGE2 μετρήθηκε από το μέσο.Η δοκιμασία ΜΤΤ χρησιμοποιήθηκε για την εξέταση της κυτταροτοξικότητας της τανσινόνης Ι σε ακατέργαστα κύτταρα.Το Tanshinone I στα 100 μΜ δεν έδειξε καμία κυτταροτοξικότητα [1].

Πείραμα σε ζώα:Προκειμένου να αξιολογηθεί η ανασταλτική δράση της τανσινόνης Ι σε ζωικά μοντέλα οξείας και χρόνιας φλεγμονής, χρησιμοποιήθηκαν μοντέλα οίδημα ποδιού που προκαλείται από καραγενάνη (CGN) και επαγόμενη από ανοσοενισχυτικό αρθρίτιδα (ΑΙΑ).Εν ολίγοις, 1% CGN διαλυμένο σε αλατούχο διάλυμα χωρίς πυρετογόνο (0,05 ml) εγχύθηκε στο δεξιό πίσω πόδι των αρουραίων για δοκιμή οιδήματος ποδιού.Μετά από 5 ώρες, το πρήξιμο των νυχιών που υπέστησαν αγωγή μετρήθηκε με χρήση πληθυσμογράφου.Η τανσινόνη Ι διαλυμένη σε 0,5% CMC χορηγήθηκε από το στόμα 1 ώρα πριν από την ένεση CGN.Για τη δοκιμή AIA, η αρθριτική φλεγμονή προκλήθηκε με έγχυση Mycobacterium lactis (0,6 ml/αρουραίο) διαλυμένο σε ορυκτέλαιο στο δεξιό οπίσθιο πόδι των αρουραίων.Τανσινόνη μου χορηγούνταν από το στόμα κάθε μέρα.Η επέκταση των επεξεργασμένων και μη επεξεργασμένων νυχιών μετρήθηκε με χρήση πληθυσμογράφου.

Βιβλιογραφικές αναφορές:[1] Kim SY, et al.Επιδράσεις Tanshinone I που απομονώθηκε από Salvia miltiorrhiza bunge στον μεταβολισμό του αραχιδονικού οξέος και στις in vivo φλεγμονώδεις αποκρίσεις.Phytother Res.2002 Νοέμβριος;16(7):616-20.