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La description:la tanshinone I est un inhibiteur de la sPLA2 recombinante humaine de type IIA et de la cPLA2 recombinante de lapin avec une IC50 de 11 μ M et 82 μ M respectivement。

Catégories associées :voies de signalisation > > enzymes métaboliques /
protéases > > phospholipides
Domaine de recherche > > maladies cardiovasculaires
Produits Naturels > > Quinones

Cible:IC50 : 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Étude in vitro :la tanshinone I a inhibé la formation de PGE2 par les macrophages bruts induits par le LPS (IC50 = 38 μ M）。 Lorsque la tanshinone I et le LPS ont été ajoutés en même temps, le composé a inhibé de manière significative la production de 10 à 100 μ PGE2 de M (IC50 = 38 μ M ）。 Lorsqu'elle est ajoutée après induction complète de la COX-2, la tanshinone I a également réduit la production de PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 Le fait que la tanshinone I inhibe la production de PGE 2 par la COX-2 pré-induite suggère fortement que le composé peut inhibent directement l'activité de la COX-2 et/ou affectent l'activité de la PLA2 Lorsque la tanshinone I a été incubée avec deux formes différentes de phospholipase A2 (PLA2), elle a significativement inhibé la sPLA2 de manière dépendante de la concentration (IC50 = 11) μ M). puissance, la tanshinone I a également inhibé cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Étude in vivo :la tanshinone I a montré une activité anti-inflammatoire dans l'œdème de la patte induit par la carraghénine et l'arthrite induite par l'adjuvant chez le rat.Afin d'établir l'activité anti-inflammatoire de la tanshinone I, des modèles animaux classiques d'inflammation aiguë et chronique [carraghénine de rat (CGN) - œdème de patte induit et arthrite induite par adjuvant de rat (AIA)] ont été utilisés.Lorsque la tanshinone I par voie orale, elle a montré une activité anti-inflammatoire significative contre l'œdème de la patte induit par le CGN (47% d'inhibition à 160 mg/kg), alors que l'IC50 de l'indométhacine était de 7,1 mg/kg.Dans l'AIA, la tanshinone I a donné 27 % d'inhibition de l'inflammation secondaire au jour 18 à une dose orale de 50 mg/kg/jour, tandis que la prednisolone (5 mg/kg/jour) a montré une inhibition efficace (65 %) [1]

Expérience Kinase :comme source de PLA2, la sPLA2 recombinante humaine (type IIA) a été purifiée à partir de cellules CHO transfectées avec le gène PLA2, et la cPLA2 plaquettaire recombinante de lapin a été obtenue par son expression dans le baculovirus.Mélange réactionnel standard (200) μ 50) Il contenait 100 mm de tampon Tris HCl (pH 9,0), 6 mM CaCl2 et 20 nmol de 1-acyl - [1-14C] - arachidonyl Sn glycérol phosphate éthanolamine (2000 CPM/nmol).Soit il n'y avait pas de tanshinone I. La réaction a été démarrée en ajoutant 50 NG de sPLA2 ou de cPLA2 purifiés.Après 20 minutes à 37°C, les acides gras libres produits ont été analysés.Dans ces conditions standard, environ 10 % des acides gras libres sont libérés du substrat phospholipidique ajouté dans le mélange réactionnel sans tanshinone I [1].

Expérience cellulaire :les cellules 264.7 brutes ont été cultivées avec du DMEM additionné de 10% de FBS et de 1% d'antibiotiques à 37 ℃ sous 5% de CO2.En bref, les cellules ont été ensemencées sur des plaques 96 puits (2) × 10 (5 cellules/puits).Sauf indication contraire, du LPS (1ug/ml) et de la tanshinone I ont été ajoutés et incubés pendant 24 heures.La concentration en PGE2 dans le milieu a été mesurée à l'aide du kit EIA pour PGE2.Afin de déterminer l'effet de la tanshinone I sur la production de PGE 2 après induction de COX-2, les cellules ont été mélangées avec du LPS (1 µG/ml) pendant 24 heures et lavées abondamment.Ensuite, la tanshinone I a été ajoutée sans LPS et les cellules ont été cultivées pendant 24 heures supplémentaires.La concentration en PGE2 a été mesurée à partir du milieu.Le test MTT a été utilisé pour examiner la cytotoxicité de la tanshinone I sur les cellules brutes.La tanshinone I à 100 μM n'a montré aucune cytotoxicité [1].

Expérimentation animale :Afin d'évaluer l'activité inhibitrice de la tanshinone I sur des modèles animaux inflammatoires aigus et chroniques, des modèles d'œdème de la patte induit par le carraghénane (CGN) de rat et d'arthrite induite par l'adjuvant (AIA) ont été utilisés.En bref, 1% de CGN dissous dans une solution saline apyrogène (0,05 ml) a été injecté dans la patte arrière droite de rats pour un test d'œdème de la patte.Après 5 heures, le gonflement des griffes traitées a été mesuré à l'aide d'un pléthysmographe.La tanshinone I dissoute dans 0,5 % de CMC a été administrée par voie orale 1 heure avant l'injection de CGN.Pour le test AIA, l'inflammation arthritique a été induite en injectant Mycobacterium lactis (0,6 ml/rat) dissous dans de l'huile minérale dans la patte arrière droite des rats.Tanshinone m'a été administré par voie orale tous les jours.L'expansion des griffes traitées et non traitées a été mesurée à l'aide d'un pléthysmographe.

Références:[1] Kim SY, et al.Effets de la Tanshinone I isolée à partir de Salvia miltiorrhiza bunge sur le métabolisme de l'acide arachidonique et les réponses inflammatoires in vivo.Phytother Res.2002 novembre ;16(7):616-20.