პროდუქტები

აღწერა:ტანშინონი I არის IIA ტიპის ადამიანის რეკომბინანტული sPLA2 და კურდღლის რეკომბინანტული cPLA2 ინჰიბიტორი IC50 11, შესაბამისად, μ M და 82 μ M.

დაკავშირებული კატეგორიები:სასიგნალო გზები > > მეტაბოლური ფერმენტები /
პროტეაზები > > ფოსფოლიპიდები
კვლევის სფერო > > გულ-სისხლძარღვთა დაავადებები
ნატურალური პროდუქტები > > ქინონები

სამიზნე:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

ინ ვიტრო კვლევა:ტანშინონი I აფერხებდა PGE2-ის ფორმირებას LPS-ით გამოწვეული ნედლეული მაკროფაგების მიერ (IC50 = 38 μ M）. როდესაც ტანშინონი I და LPS ერთდროულად დაემატა, ნაერთი მნიშვნელოვნად აფერხებდა 10-100 μ PGE2 M-ის წარმოებას (IC50 = 38 μM). ）。 COX-2-ის სრული ინდუქციის შემდეგ დამატებისას, ტანშინონი I ასევე ამცირებს PGE2-ის გამომუშავებას (IC50 = 46) μ M）. ის ფაქტი, რომ ტანშინონი I აფერხებს PGE 2-ის გამომუშავებას წინასწარ ინდუცირებული COX-2-ის მეშვეობით, მტკიცედ მიუთითებს იმაზე, რომ ნაერთს შეუძლია პირდაპირ თრგუნავს COX-2 აქტივობას და/ან გავლენას ახდენს PLA2 აქტივობაზე. როდესაც tanshinone I ინკუბირებული იყო ფოსფოლიპაზა A2-ის ორი განსხვავებული ფორმით (PLA2), ის მნიშვნელოვნად თრგუნავს sPLA2 კონცენტრაციაზე დამოკიდებული გზით (IC50 = 11) μ M). მიუხედავად მისი დაბალი პოტენცია, ტანშინონი I ასევე აფერხებდა cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

In Vivo კვლევა:ტანშინონი I აჩვენა ანთების საწინააღმდეგო აქტივობა კარაგენანით გამოწვეული თათების შეშუპებისა და ადიუვანტური ართრიტის დროს ვირთხებში.ტანშინონი I-ის ანთების საწინააღმდეგო აქტივობის დადგენის მიზნით, გამოყენებული იქნა მწვავე და ქრონიკული ანთების კლასიკური ცხოველური მოდელები [ვირთხის კარაგენანი (CGN) - ინდუცირებული თათების შეშუპება და ვირთხის ადიუვანტური ინდუცირებული ართრიტი (AIA)].ტანინონი I პერორალური მიღებისას, მან აჩვენა მნიშვნელოვანი ანთების საწინააღმდეგო აქტივობა CGN-ით გამოწვეული თათების შეშუპების მიმართ (47% ინჰიბირება 160 მგ/კგ-ზე), ხოლო ინდომეტაცინის IC50 იყო 7.1 მგ/კგ.AIA-ში, ტანშინონ I მისცა მეორადი ანთების 27% დათრგუნვა მე-18 დღეს პერორალური დოზით 50 მგ/კგ/დღეში, ხოლო პრედნიზოლონი (5 მგ/კგ/დღეში) აჩვენებდა ეფექტურ ინჰიბირებას (65%) [1]

კინაზის ექსპერიმენტი:როგორც PLA2-ის წყარო, ადამიანის რეკომბინანტული sPLA2 (ტიპი IIA) გაწმენდილი იყო CHO უჯრედებიდან, რომლებიც ტრანსფექტირებული იყო PLA2 გენით, და კურდღლის რეკომბინანტული თრომბოციტების cPLA2 მიღებულ იქნა მისი ექსპრესიით ბაკულოვირუსში.სტანდარტული რეაქციის ნარევი (200) μ 50) იგი შეიცავდა 100 მმ Tris HCl ბუფერს (pH 9.0), 6 მმ CaCl2 და 20 ნმოლ 1-აცილს - [1-14C] - არაქიდონილ Sn გლიცეროლის ფოსფატ ეთანოლამინს (2000 CPM / nn).ან არ იყო tanshinone I. რეაქცია დაიწყო 50NG გაწმენდილი sPLA2 ან cPLA2 დამატებით.20 წუთის შემდეგ 37 ℃ ტემპერატურაზე, წარმოებული თავისუფალი ცხიმოვანი მჟავები გაანალიზდა.ამ სტანდარტულ პირობებში, თავისუფალი ცხიმოვანი მჟავების დაახლოებით 10% გამოიყოფა დამატებული ფოსფოლიპიდური სუბსტრატიდან სარეაქციო ნარევში ტანშინონის გარეშე [1].

უჯრედის ექსპერიმენტი:ნედლეული 264.7 უჯრედი კულტივირებული იყო DMEM-ით, რომელსაც დაემატა 10% FBS და 1% ანტიბიოტიკები 37 ℃ 5% CO2-ის ქვეშ.მოკლედ, უჯრედები დათესეს 96 ჭაბურღილის ფირფიტაზე (2) × 10 (5 უჯრედი/ჭა).თუ სხვა რამ არ არის მითითებული, LPS (1მგ/მლ) და ტანშინონი I დაემატა და ინკუბირებულია 24 საათის განმავლობაში.PGE2 კონცენტრაცია გარემოში გაზომილი იყო EIA ნაკრების გამოყენებით PGE2-ისთვის.COX-2 ინდუქციის შემდეგ ტანშინონი I-ის ეფექტის დასადგენად PGE 2-ის გამომუშავებაზე, უჯრედები შერეული იყო LPS-ით (1 μგ/მლ) 24 საათის განმავლობაში და კარგად გარეცხეს.შემდეგ, tanshinone I დაემატა LPS-ის გარეშე და უჯრედები კულტივირებული იყო კიდევ 24 საათის განმავლობაში.PGE2 კონცენტრაცია გაზომილი იყო საშუალოდან.MTT ანალიზი გამოიყენებოდა ტანშინონი I-ის ციტოტოქსიკურობის შესამოწმებლად ნედლეულ უჯრედებზე.ტანშინონი I 100 μM-ზე არ აჩვენებდა ციტოტოქსიკურობას [1].

ცხოველებზე ექსპერიმენტი:ტანშინონი I-ის ინჰიბიტორული აქტივობის შესაფასებლად მწვავე და ქრონიკული ანთებითი ცხოველების მოდელებზე გამოყენებული იყო ვირთხის კარაგენანი (CGN) - ინდუცირებული თათების შეშუპება და ადიუვანტური ინდუცირებული ართრიტის (AIA) მოდელები.მოკლედ, 1% CGN გახსნილი პიროგენისგან თავისუფალ ფიზიოლოგიურ ხსნარში (0.05 მლ) შეიყვანეს ვირთხების მარჯვენა უკანა თათში თათების შეშუპების ტესტისთვის.5 საათის შემდეგ, დამუშავებული კლანჭების შეშუპება გაზომეს პლეტისმოგრაფის გამოყენებით.0.5% CMC-ში გახსნილი ტანშინონი I შეყვანილი იყო პერორალურად CGN ინექციამდე 1 საათით ადრე.AIA ტესტისთვის, ართრიტის ანთება გამოწვეული იყო ვირთხების მარჯვენა უკანა თათში მინერალურ ზეთში გახსნილი Mycobacterium lactis (0.6მლ/ვირთხა) ინექციით.Tanshinone მე მიღებულ იქნა პერორალურად ყოველდღე.დამუშავებული და დაუმუშავებელი კლანჭების გაფართოება გაზომილი იყო პლეტისმოგრაფის გამოყენებით.

ცნობები:[1] კიმ საი და სხვ.Salvia miltiorrhiza bunge-დან გამოყოფილი Tanshinone I-ის ეფექტი არაქიდონის მჟავას მეტაბოლიზმზე და in vivo ანთებით რეაქციებზე.Phytother Res.2002 ნოემბერი;16 (7): 616-20.