прадукты

Апісанне:таншынон I з'яўляецца рэкамбінантным інгібітарам sPLA2 чалавека і рэкамбінантным cPLA2 тыпу IIA чалавека з IC50 11 мкМ адпаведна і 82 мкМ.

Звязаныя катэгорыі:сігнальныя шляхі > > метабалічныя ферменты /
протеазы > > фасфаліпіды
Поле даследаванняў > > сардэчна-сасудзістыя захворванні
Натуральныя прадукты > > Хиноны

Мэта:IC50: 11 мкМ (sPLA2), 82 мкМ (cPLA2)[1].

Даследаванне in vitro:таншынон I інгібіраваў утварэнне PGE2 неапрацаванымі макрафагамі, індукаванымі ЛПС (IC50 = 38 мкМ). ）。 Пры даданні пасля поўнай індукцыі ЦОГ-2 таншынон I таксама зніжае выпрацоўку PGE2 (IC50 = 46) мкМ）。 Той факт, што таншынон I інгібіруе выпрацоўку PGE2 праз папярэдне індукаваны ЦОГ-2, пераканаўча сведчыць аб тым, што злучэнне можа непасрэдна інгібіруюць актыўнасць ЦОГ-2 і / або ўплываюць на актыўнасць PLA2. Калі таншынон I інкубавалі з дзвюма рознымі формамі фасфаліпазы A2 (PLA2), ён значна інгібіраваў sPLA2 у залежнасці ад канцэнтрацыі (IC50 = 11) мкМ. Нягледзячы на ​​​​нізкую патэнцыя, таншынон I таксама інгібіраваў cPLA2 (IC50 = 82) мкМ）[1]

Даследаванне in Vivo:tanshinone I паказаў супрацьзапаленчую актыўнасць пры карагенане, выкліканым ацёкам лапы і індукаваным адъювантом артрыце ў пацукоў.Для таго, каб усталяваць супрацьзапаленчую актыўнасць таншинона I, былі выкарыстаны класічныя мадэлі вострага і хранічнага запалення на жывёл [ацёк лапы, выкліканы каррагинаном (CGN) і артрыт, выкліканы ад'ювантам у пацукоў (AIA)].Пры пероральном прыёме таншинона I ён прадэманстраваў значную супрацьзапаленчую актыўнасць супраць ацёку лапы, выкліканага CGN (47% інгібіравання пры 160 мг / кг), у той час як IC50 индометацина складала 7,1 мг / кг.У AIA таншынон I даў 27% інгібіравання другаснага запалення на 18 дзень пры пероральном прыёме 50 мг / кг / дзень, у той час як преднізолон (5 мг / кг / дзень) паказаў эфектыўнае інгібіраванне (65%) [1]

Эксперымент з кіназай:у якасці крыніцы PLA2 рэкамбінантны sPLA2 чалавека (тып IIA) быў ачышчаны з клетак CHO, трансфікаваных генам PLA2, і рэкамбінантны cPLA2 трамбацытаў труса быў атрыманы шляхам яго экспрэсіі ў бакулавірусе.Стандартная рэакцыйная сумесь (200) μ 50) Яна ўтрымлівала 100 мМ буфера Tris HCl (pH 9,0), 6 мм CaCl2 і 20 нмоль 1-ацыл - [1-14C] - арахідоніл Sn гліцэрынфасфат этаналамін (2000 CPM / нмоль).Або не было таншынона I. рэакцыя пачалася з дадання 50NG вычышчанага sPLA2 або cPLA2.Праз 20 хвілін пры 37 ℃ былі прааналізаваны атрыманыя свабодныя тоўстыя кіслоты.У гэтых стандартных умовах з дададзенага фасфаліпіднага субстрата ў рэакцыйнай сумесі без таншынону I вызваляецца каля 10% свабодных тоўстых кіслот [1].

Клеткавы эксперымент:неапрацаваныя клеткі 264,7 культывавалі з DMEM з даданнем 10% FBS і 1% антыбіётыкаў пры 37 ℃ і 5% CO2.Карацей кажучы, клеткі высейвалі на 96-лункавыя пласціны (2) × 10 (5 клетак на лунку).Калі не пазначана іншае, LPS (1 мкг/мл) і таншынон I былі дададзены і інкубаваны на працягу 24 гадзін.Канцэнтрацыю PGE2 у асяроддзі вымяралі з дапамогай набору EIA для PGE2.Каб вызначыць уплыў таншинона I на выпрацоўку PGE 2 пасля індукцыі ЦОГ-2, клеткі змешвалі з ЛПС (1 мкг / мл) на працягу 24 гадзін і старанна прамывалі.Затым быў дададзены таншынон I без ЛПС і клеткі культываваліся яшчэ 24 гадзіны.Канцэнтрацыю PGE2 вымяралі ў асяроддзі.МТТ аналіз быў выкарыстаны для вывучэння цитотоксичности таншинона I на неапрацаваных клетках.Таншынон I пры 100 мкМ не выяўляў цитотоксичности [1].

Эксперымент на жывёл:для таго, каб ацаніць інгібіруе актыўнасць таншинона I на мадэлях жывёл вострага і хранічнага запалення, былі выкарыстаны мадэлі ацёку лапы, выкліканага карагенаном пацукоў (CGN), і артрыту, выкліканага адъювантом (AIA).Карацей кажучы, 1% CGN, раствораны ў апірагенным фізіялагічным растворы (0,05 мл), уводзілі ў правую заднюю лапу пацукоў для тэсту на ацёк лапы.Праз 5 гадзін прыпухласць апрацаваных кіпцюроў вымяралі з дапамогай плетизмографа.Таншынон I, раствораны ў 0,5% КМЦ, уводзілі перорально за 1 гадзіну да ін'екцыі ЦГН.Для тэсту AIA артрытнае запаленне было выклікана ін'екцыяй Mycobacterium lactis (0,6 мл/пацука), растворанага ў мінеральным алеі, у правую заднюю лапу пацукоў.Таншинон я прымаў перорально кожны дзень.Пашырэнне апрацаваных і неапрацаваных кіпцюроў вымяралі з дапамогай плетизмографа.

Спіс літаратуры:[1] Кім SY і інш.Ўздзеянне Tanshinone я ізаляваны з Salvia miltiorrhiza Bunge на метабалізм арахидоновой кіслаты і ў натуральных умовах запаленчыя рэакцыі.Phytother Res.лістапад 2002 г.;16 (7): 616-20.