منتجات

وصف:tanshinone I هو مثبط sPLA2 المؤتلف البشري من النوع IIA ومثبط cPLA2 المؤتلف من Rabbit مع IC لـ 11 ميكرومتر على التوالي و 82 ميكرومتر

فئات ذات صلة:مسارات الإشارات>> الإنزيمات الأيضية /
البروتياز>> الفوسفوليبيد
مجال البحث>> أمراض القلب والأوعية الدموية
المنتجات الطبيعية>> Quinones

استهداف:IC50: 11 ميكرومتر (sPLA2) ، 82 ميكرومتر (cPLA2) [1].

دراسة في المختبر:tanshinone I منع تكوين PGE2 بواسطة الضامة المستحثة بـ LPS (IC = 38 ميكرومتر）。 عندما تمت إضافة tanshinone I و LPS في نفس الوقت ، منع المركب بشكل كبير إنتاج 10-100 ميكرومتر من PGE2 من M (IC = 38 ميكرومتر) ）。 عند إضافته بعد الحث الكامل لـ COX-2 ، قلل tanshinone I أيضًا من إنتاج PGE2 (IC50 = 46) μ M） حقيقة أن tanshinone I يثبط إنتاج PGE 2 من خلال COX-2 المستحث مسبقًا يشير بقوة إلى أن المركب يمكنه يثبط نشاط COX-2 بشكل مباشر و / أو يؤثر على نشاط PLA2. عندما تم احتضان tanshinone I بنوعين مختلفين من phospholipase A2 (PLA2) ، فإنه يثبط بشكل كبير sPLA2 بطريقة تعتمد على التركيز (IC50 = 11) ميكرومتر). على الرغم من انخفاضه الفاعلية ، tanshinone I أيضًا منع cPLA2 (IC50 = 82) μ M） [1]

دراسة في فيفو:أظهر tanshinone I نشاطًا مضادًا للالتهابات في الوذمة التي يسببها الكاراجينان والتهاب المفاصل الناجم عن المساعدة في الجرذان.من أجل تحديد النشاط المضاد للالتهابات من tanshinone I ، تم استخدام نماذج حيوانية كلاسيكية للالتهاب الحاد والمزمن [وذمة مخلب الجرذان (CGN) والتهاب المفاصل الناجم عن مساعدة الفئران (AIA)].عند تناول tanshinone I عن طريق الفم ، أظهر نشاطًا كبيرًا مضادًا للالتهابات ضد وذمة القدم المستحثة بـ CGN (تثبيط 47 ٪ عند 160 مجم / كجم) ، بينما كان تركيز IC50 للإندوميتاسين 7.1 مجم / كجم.في AIA ، أعطى tanshinone I تثبيطًا بنسبة 27 ٪ للالتهاب الثانوي في اليوم 18 بجرعة فموية قدرها 50 مجم / كجم / يوم ، بينما أظهر بريدنيزولون (5 مجم / كجم / يوم) تثبيطًا فعالًا (65 ٪) [1]

تجربة كيناز:كمصدر لـ PLA2 ، تمت تنقية sPLA2 المؤتلف البشري (النوع IIA) من خلايا CHO المنقولة بجين PLA2 ، وتم الحصول على الصفائح الدموية المؤتلفة من الأرانب cPLA2 من خلال تعبيرها في الفيروس البكتيري.خليط التفاعل القياسي (200) μ 50) يحتوي على 100 مم Tris HCl عازلة (pH 9.0) ، 6 ملي كلوريد الكالسيوم و 20 نانومول من 1-أسيل - [1-14 درجة مئوية] - أراكيدونيل سن جلسرين فوسفات إيثانولامين (2000 CPM / nmol).أو لم يكن هناك tanshinone I. بدأ التفاعل بإضافة 50NG منقى sPLA2 أو cPLA2.بعد 20 دقيقة عند 37 ℃ ، تم تحليل الأحماض الدهنية الحرة المنتجة.في ظل هذه الظروف القياسية ، يتم إطلاق حوالي 10٪ من الأحماض الدهنية الحرة من الركيزة الفسفورية المضافة في خليط التفاعل بدون tanshinone I [1].

تجربة الخلية:تمت زراعة 264.7 خلية خام مع DMEM مكملًا بـ 10 ٪ FBS و 1 ٪ من المضادات الحيوية عند 37 ℃ تحت 5 ٪ من ثاني أكسيد الكربون.باختصار ، تم بذر الخلايا على 96 صفيحة جيدة (2) × 10 (5 خلايا / بئر).ما لم يذكر خلاف ذلك ، تمت إضافة LPS (1ug / ml) و tanshinone I واحتضانها لمدة 24 ساعة.تم قياس تركيز PGE2 في الوسط باستخدام مجموعة EIA لـ PGE2.من أجل تحديد تأثير tanshinone I على إنتاج PGE 2 بعد تحريض COX-2 ، تم خلط الخلايا بـ LPS (1 ميكروغرام / مل) لمدة 24 ساعة وغسلها جيدًا.بعد ذلك ، تمت إضافة tanshinone I بدون LPS وتمت زراعة الخلايا لمدة 24 ساعة أخرى.تم قياس تركيز PGE2 من الوسط.تم استخدام اختبار MTT لفحص السمية الخلوية لـ tanshinone I على الخلايا الخام.لم يظهر Tanshinone I عند 100 ميكرومتر أي سمية خلوية [1].

تجربة الحيوان:من أجل تقييم النشاط المثبط لـ tanshinone I على النماذج الحيوانية الالتهابية الحادة والمزمنة ، تم استخدام نماذج الوذمة التي يسببها الجرذان carrageenan (CGN) والتهاب المفاصل الناجم عن المساعدة (AIA).باختصار ، تم حقن 1٪ CGN المذاب في محلول ملحي خالٍ من البيروجين (0.05 مل) في مخلب الفئران الأيمن الخلفي لاختبار وذمة القدم.بعد 5 ساعات ، تم قياس تورم المخالب المعالجة باستخدام مخطط التحجم.تم إذابة Tanshinone I في 0.5 ٪ CMC عن طريق الفم قبل ساعة واحدة من حقن CGN.بالنسبة لاختبار AIA ، تم إحداث التهاب المفاصل عن طريق حقن Mycobacterium lactis (0.6 مل / جرذ) مذاب في الزيت المعدني في المخلب الأيمن للفئران.كنت أتناول Tanshinone عن طريق الفم كل يوم.تم قياس تمدد المخالب المعالجة وغير المعالجة باستخدام مقياس التحجم.

مراجع:[1] كيم سي وآخرون.تأثيرات Tanshinone I المعزولة من Salvia miltiorrhiza bunge على استقلاب حمض الأراكيدونيك والاستجابات الالتهابية في الجسم الحي.Phytother Res.2002 نوفمبر16 (7): 616-20.