Ապրանքներ

Նկարագրություն:tanshinone I-ը IIA տիպի մարդու ռեկոմբինանտ sPLA2 և Rabbit Recombinant cPLA2 ինհիբիտոր է՝ IC50 համապատասխանաբար 11 μ M և 82 μ M:

Առնչվող կատեգորիաներ:ազդանշանային ուղիներ > > մետաբոլիկ ֆերմենտներ /
պրոտեազներ > > ֆոսֆոլիպիդներ
Հետազոտական ​​դաշտ >> սրտանոթային հիվանդություն
Բնական արտադրանք >> Քինոններ

Թիրախ:IC50՝ 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1]:

In vitro ուսումնասիրություն.տանշինոն I-ն արգելակում էր PGE2-ի ձևավորումը LPS-ի կողմից առաջացած չմշակված մակրոֆագների կողմից (IC50 = 38 μ M）։ Երբ տանշինոն I-ը և LPS-ը միաժամանակ ավելացվեցին, միացությունը զգալիորեն արգելակեց 10-100 μ PGE2 M-ի արտադրությունը (IC50 = 38 μM): ）。 Երբ ավելացվում է COX-2-ի ամբողջական ինդուկցիայից հետո, տանշինոն I-ը նաև նվազեցնում է PGE2-ի արտադրությունը (IC50 = 46) μ M）։ Այն փաստը, որ տանշինոն I-ն արգելակում է PGE 2-ի արտադրությունը նախապես առաջացած COX-2-ի միջոցով, խիստ հուշում է, որ միացությունը կարող է. ուղղակիորեն արգելակում է COX-2-ի ակտիվությունը և/կամ ազդում PLA2-ի ակտիվության վրա: Երբ տանշինոն I-ը ինկուբացվել է ֆոսֆոլիպազ A2-ի երկու տարբեր ձևերով (PLA2), այն զգալիորեն արգելակել է sPLA2-ը կոնցենտրացիայից կախված եղանակով (IC50 = 11) μ M): Չնայած դրա ցածր մակարդակին ուժը, տանշինոն I-ը նաև արգելակել է cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

In Vivo ուսումնասիրություն.tanshinone I-ը հակաբորբոքային ակտիվություն է ցույց տվել առնետների մոտ կարագինանով առաջացած թաթերի այտուցվածության և օժանդակ արթրիտի դեպքում:Տանշինոն I-ի հակաբորբոքային ակտիվությունը հաստատելու համար օգտագործվել են սուր և քրոնիկ բորբոքման կենդանական դասական մոդելներ [առնետի կարագինան (CGN)՝ առաջացած թաթերի այտուց և առնետի օժանդակությամբ առաջացած արթրիտ (AIA)]:Երբ բանավոր տանշինոն I-ը, այն ցույց տվեց զգալի հակաբորբոքային ակտիվություն CGN-ով առաջացած թաթերի այտուցի դեմ (47% արգելակում 160 մգ/կգ-ում), մինչդեռ ինդոմետասինի IC50-ը ​​7,1 մգ/կգ էր:AIA-ում տանշինոն I-ը երկրորդական բորբոքման 27% արգելակում է տվել 18-րդ օրը բանավոր 50 մգ/կգ/օր դոզանով, մինչդեռ պրեդնիզոլոնը (5 մգ/կգ/օր) ցույց է տվել արդյունավետ արգելակում (65%) [1]

Կինազի փորձ.Որպես PLA2-ի աղբյուր՝ մարդու ռեկոմբինանտ sPLA2-ը (տեսակ IIA) մաքրվել է CHO բջիջներից, որոնք փոխակերպվել են PLA2 գենով, և նապաստակի ռեկոմբինանտ թրոմբոցիտների cPLA2-ը ստացվել է բակուլովիրուսում դրա արտահայտման միջոցով:Ստանդարտ ռեակցիայի խառնուրդ (200) μ 50) Այն պարունակում էր 100 մմ Tris HCl բուֆեր (pH 9,0), 6 մՄ CaCl2 և 20 նմոլ 1-ացիլ - [1-14C] - arachidonyl Sn գլիցերին ֆոսֆատ էթանոլամին (2000 CPM / նմ):Կամ չկար տանշինոն I. ռեակցիան սկսվել է 50NG մաքրված sPLA2 կամ cPLA2 ավելացնելով:20 րոպե հետո 37 ℃ ջերմաստիճանում, արտադրված ազատ ճարպաթթուները վերլուծվել են:Այս ստանդարտ պայմաններում ազատ ճարպաթթուների մոտ 10%-ն ազատվում է ավելացված ֆոսֆոլիպիդային սուբստրատից ռեակցիայի խառնուրդում՝ առանց տանշինոն I [1]:

Բջջային փորձ.չմշակված 264.7 բջիջները մշակվել են DMEM-ով, որը լրացվել է 10% FBS-ով և 1% հակաբիոտիկներով 37 ℃ ջերմաստիճանում 5% CO2-ի տակ:Մի խոսքով, բջիջները ցանվել են 96 ջրհորի թիթեղների վրա (2) × 10 (5 բջիջ / ջրհոր):Եթե ​​այլ բան նշված չէ, LPS (1 մգ/մլ) և թանշինոն I ավելացվել են և ինկուբացվել 24 ժամ:PGE2-ի կոնցենտրացիան միջավայրում չափվել է PGE2-ի ՇՄԱԳ փաթեթի միջոցով:COX-2 ինդուկցիայից հետո տանշինոն I-ի ազդեցությունը PGE 2-ի արտադրության վրա որոշելու համար բջիջները խառնվել են LPS-ով (1 μԳ/մլ) 24 ժամ և մանրակրկիտ լվացվել:Այնուհետև թանշինոն I ավելացվեց առանց LPS-ի, և բջիջները աճեցվեցին ևս 24 ժամ:PGE2-ի կոնցենտրացիան չափվել է միջավայրից:MTT փորձարկումն օգտագործվել է չմշակված բջիջների վրա տանշինոն I-ի ցիտոտոքսիկությունը հետազոտելու համար:Tanshinone I-ը 100 μ M-ում որևէ ցիտոտոքսիկություն չի ցուցաբերել [1]:

Կենդանիների փորձ.Սուր և քրոնիկ բորբոքային կենդանիների մոդելների վրա տանշինոն I-ի արգելակող ակտիվությունը գնահատելու համար օգտագործվել են առնետների կարագինան (CGN) - ազդեցիկ թաթերի այտուցվածության և ադյուվանտ հրահրված արթրիտի (AIA) մոդելները:Կարճ ասած, 1% CGN լուծարված պիրոգենից ազատ ֆիզիոլոգիական լուծույթում (0,05 մլ) ներարկվել է առնետների աջ հետևի թաթին՝ թաթերի այտուցի թեստի համար:5 ժամ հետո բուժված ճանկերի այտուցը չափվել է պլետիզմոգրաֆի միջոցով:0.5% CMC-ում լուծարված Tanshinone I-ը բանավոր ընդունվել է CGN ներարկումից 1 ժամ առաջ:AIA թեստի համար արթրիտի բորբոքումն առաջացել է առնետների աջ հետևի թաթին հանքային յուղի մեջ լուծված Mycobacterium lactis (0,6 մլ/առնետ) ներարկմամբ:Tanshinone ինձ ամեն օր բանավոր էին ընդունում:Բուժված և չմշակված ճանկերի ընդլայնումը չափվել է պլետիզմոգրաֆի միջոցով:

Հղումներ:[1] Kim SY, et al.Salvia miltiorrhiza bunge-ից մեկուսացված Tanshinone I-ի ազդեցությունը արախիդոնաթթվի նյութափոխանակության և in vivo բորբոքային ռեակցիաների վրա:Phytother Res.2002 նոյ.16 (7): 616-20.