Mahsulotlar

Tavsif:tanshinone I - bu IIA tipidagi inson rekombinant sPLA2 va quyon rekombinant cPLA2 ingibitori, mos ravishda 11 mkM va 82 mM IC50.

Tegishli toifalar:signal yo'llari >> metabolik fermentlar /
proteazlar > > fosfolipidlar
Tadqiqot sohasi > > yurak-qon tomir kasalliklari
Tabiiy mahsulotlar >> Xinonlar

Maqsad:IC50: 11 mkM (sPLA2), 82 mkM (cPLA2)[1].

In Vitro tadqiqoti:tanshinone I LPS tomonidan qo'zg'atilgan xom makrofaglar tomonidan PGE2 shakllanishini inhibe qildi (IC50 = 38 m M）。 Tanshinone I va LPS bir vaqtning o'zida qo'shilganda, birikma 10-100 m PGE2 M (IC50 = 38 m M) ishlab chiqarishni sezilarli darajada inhibe qildi. ）。 COX-2 ning to‘liq induksiyasidan so‘ng qo‘shilganda, tanshinon I PGE2 (IC50 = 46) m M ishlab chiqarishni ham kamaytirdi. COX-2 faolligini to'g'ridan-to'g'ri inhibe qiladi va/yoki PLA2 faolligiga ta'sir qiladi.Tanshinon I ikki xil fosfolipaza A2 (PLA2) bilan inkubatsiya qilinganida, u sPLA2 ni konsentratsiyaga bog'liq holda (IC50 = 11) m M) sezilarli darajada inhibe qilgan). quvvat, tanshinon Men ham cPLA2 (IC50 = 82) m M） [1] ni inhibe qildim.

In Vivo tadqiqoti:tanshinone I kalamushlarda karragen bilan qo'zg'atilgan panja shishi va yordamchi artritda yallig'lanishga qarshi faollikni ko'rsatdi.Tanshinon I ning yallig'lanishga qarshi faolligini aniqlash uchun o'tkir va surunkali yallig'lanishning klassik hayvon modellari [kalamush karragenan (CGN) - panjaning shishishi va kalamush yordamchisi qo'zg'atadigan artrit (AIA)] ishlatilgan.Qachon og'iz tanshinone I, u CGN sabab panja shish (160 mg / kg da 47% inhibisyon) qarshi muhim yallig'lanishga qarshi faollik ko'rsatdi, indometazin IC50 7,1 mg / kg edi.AIAda tanshinon I 18-kuni 50 mg / kg / kun og'iz dozasida ikkilamchi yallig'lanishni 27% inhibe qildi, prednizolon (5 mg / kg / kun) samarali inhibisyon (65%) ko'rsatdi [1]

Kinaz tajribasi:PLA2 manbai sifatida inson rekombinanti sPLA2 (IIA turi) PLA2 geni bilan transfektsiyalangan CHO hujayralaridan tozalangan va quyon rekombinant trombotsitlari cPLA2 uning bakulovirusda ifodalanishi orqali olingan.Standart reaksiya aralashmasi (200) m 50) Unda 100 mm Tris HCl buferi (pH 9,0), 6 mM CaCl2 va 20 nmol 1-atsil - [1-14C] - araxidonil Sn glitserin fosfat etanolamin (2000 CPM / n) mavjud.Yoki tanshinon I yo'q edi. reaktsiya 50NG tozalangan sPLA2 yoki cPLA2 qo'shilishi bilan boshlandi.37 ℃ da 20 daqiqadan so'ng hosil bo'lgan erkin yog' kislotalari tahlil qilindi.Ushbu standart sharoitda, taxminan 10% erkin yog 'kislotalari qo'shilgan fosfolipid substratidan tanshinon Isiz [1] reaksiya aralashmasidan ajralib chiqadi.

Hujayra tajribasi:xom 264,7 hujayra 5% CO2 ostida 37 ℃ da 10% FBS va 1% antibiotiklar bilan to'ldirilgan DMEM bilan o'stirildi.Muxtasar qilib aytganda, hujayralar 96 ta quduq plitalari (2) × 10 (5 hujayra / quduq) ustiga ekilgan.Agar boshqacha ko'rsatilmagan bo'lsa, LPS (1ug / ml) va tanshinon I qo'shildi va 24 soat davomida inkubatsiya qilindi.Muhitdagi PGE2 konsentratsiyasi PGE2 uchun EIA to'plami yordamida o'lchandi.COX-2 induksiyasidan keyin tanshinon I ning PGE 2 ishlab chiqarishga ta'sirini aniqlash uchun hujayralar 24 soat davomida LPS (1 m G / ml) bilan aralashtiriladi va yaxshilab yuviladi.Keyin, tanshinone I LPSsiz qo'shildi va hujayralar yana 24 soat davomida o'stirildi.PGE2 kontsentratsiyasi muhitdan o'lchandi.MTT tahlili tanshinon I ning xom hujayralardagi sitotoksikligini tekshirish uchun ishlatilgan.Tanshinon I 100 m M da hech qanday sitotoksiklikni ko'rsatmadi [1].

Hayvonlar tajribasi:o'tkir va surunkali yallig'lanishli hayvonlar modellarida tanshinon I ning inhibitiv faolligini baholash uchun kalamush karragenan (CGN) - qo'zg'atilgan panja shishi va adjuvant qo'zg'atilgan artrit (AIA) modellari ishlatilgan.Xulosa qilib aytganda, pirogensiz fiziologik eritmada (0,05 ml) eritilgan 1% CGN panja shishini tekshirish uchun kalamushlarning o'ng orqa panjasiga yuborildi.5 soatdan keyin davolash qilingan tirnoqlarning shishishi pletismograf yordamida o'lchandi.0,5% CMC da eritilgan Tanshinone I CGN in'ektsiyasidan 1 soat oldin og'iz orqali yuborilgan.AIA testi uchun kalamushlarning o'ng orqa panjasiga mineral moyda eritilgan Mycobacterium lactis (0,6 ml / kalamush) ni yuborish orqali artrit yallig'lanishi qo'zg'atildi.Tanshinone Men har kuni og'iz orqali qabul qilindim.Davolangan va ishlov berilmagan tirnoqlarning kengayishi pletismograf yordamida o'lchandi.

Adabiyotlar:[1] Kim SY va boshqalar.Salvia miltiorrhiza bunge dan ajratilgan Tanshinone I ning araxidon kislotasi metabolizmiga va in vivo jonli yallig'lanish reaktsiyalariga ta'siri.Phytother Res.2002 yil noyabr;16(7):616-20.