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Beschreibung:Tanshinon I ist ein humaner rekombinanter sPLA2- und Kaninchen-rekombinanter cPLA2-Inhibitor vom Typ IIA mit einem IC50-Wert von 11 μM bzw. 82 μM。

Verwandte Kategorien:Signalwege > > Stoffwechselenzyme /
Proteasen > > Phospholipide
Forschungsfeld > > Herz-Kreislauf-Erkrankungen
Naturprodukte > > Chinone

Ziel:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In-vitro-Studie:Tanshinon I hemmte die Bildung von PGE2 durch LPS-induzierte rohe Makrophagen (IC50 = 38 μM）。 Wenn Tanshinon I und LPS gleichzeitig zugegeben wurden, hemmte die Verbindung signifikant die 10–100 μPGE2-Produktion von M (IC50 = 38 μM ）。 Wenn Tanshinon I nach vollständiger Induktion von COX-2 hinzugefügt wurde, reduzierte es auch die Produktion von PGE2 (IC50 = 46) μM direkt die COX-2-Aktivität hemmen und/oder die PLA2-Aktivität beeinflussen.Wenn Tanshinon I mit zwei verschiedenen Formen von Phospholipase A2 (PLA2) inkubiert wurde, hemmte es signifikant sPLA2 in einer konzentrationsabhängigen Weise (IC50 = 11) μM). Potenz, Tanshinon I hemmte auch cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

In-vivo-Studie:Tanshinon I zeigte entzündungshemmende Aktivität bei Carrageenan-induziertem Pfotenödem und Adjuvans-induzierter Arthritis bei Ratten.Um die entzündungshemmende Aktivität von Tanshinon I festzustellen, wurden klassische Tiermodelle akuter und chronischer Entzündung [Ratten-Carrageenan (CGN)-induziertes Pfotenödem und Ratten-Adjuvans-induzierte Arthritis (AIA)] verwendet.Bei oraler Gabe von Tanshinon I zeigte es eine signifikante entzündungshemmende Wirkung gegen CGN-induziertes Pfotenödem (47 % Hemmung bei 160 mg/kg), während die IC50 von Indomethacin 7,1 mg/kg betrug.Bei AIA führte Tanshinon I zu einer 27%igen Hemmung der sekundären Entzündung am Tag 18 bei einer oralen Dosis von 50 mg/kg/Tag, während Prednisolon (5 mg/kg/Tag) eine wirksame Hemmung zeigte (65%) [1]

Kinase-Experiment:als Quelle für PLA2 wurde menschliches rekombinantes sPLA2 (Typ IIA) aus CHO-Zellen gereinigt, die mit dem PLA2-Gen transfiziert waren, und rekombinantes Blutplättchen-cPLA2 aus Kaninchen wurde durch seine Expression in Baculovirus erhalten.Standardreaktionsmischung (200) μ 50) Sie enthielt 100 mm Tris-HCl-Puffer (pH 9,0), 6 mM CaCl2 und 20 nmol 1-Acyl-[1-14C]-arachidonyl-Sn-Glycerolphosphat-Ethanolamin (2000 CPM/nmol).Oder es gab kein Tanshinon I. Die Reaktion wurde durch Zugabe von 50 NG gereinigtem sPLA2 oder cPLA2 gestartet.Nach 20 Minuten bei 37 °C wurden die produzierten freien Fettsäuren analysiert.Unter diesen Standardbedingungen werden im Reaktionsgemisch ohne Tanshinon I ca. 10 % der freien Fettsäuren aus dem zugesetzten Phospholipidsubstrat freigesetzt [1].

Zellenexperiment:rohe 264.7-Zellen wurden mit DMEM, ergänzt mit 10 % FBS und 1 % Antibiotika, bei 37 °C unter 5 % CO2 kultiviert.Kurz gesagt, Zellen wurden auf Platten mit 96 Vertiefungen (2) × 10 (5 Zellen/Vertiefung) ausgesät.Sofern nicht anders angegeben, wurden LPS (1 μg/ml) und Tanshinon I zugegeben und 24 Stunden lang inkubiert.Die PGE2-Konzentration im Medium wurde unter Verwendung des EIA-Kits für PGE2 gemessen.Um die Wirkung von Tanshinon I auf die PGE 2 -Produktion nach COX-2-Induktion zu bestimmen, wurden die Zellen 24 Stunden lang mit LPS (1 &mgr;G/ml) gemischt und gründlich gewaschen.Dann wurde Tanshinon I ohne LPS zugegeben und die Zellen weitere 24 Stunden kultiviert.Die PGE2-Konzentration wurde aus dem Medium gemessen.Der MTT-Assay wurde verwendet, um die Zytotoxizität von Tanshinon I auf rohe Zellen zu untersuchen.Tanshinon I bei 100 μM zeigte keine Zytotoxizität [1].

Tierversuch:Um die inhibitorische Aktivität von Tanshinon I in Tiermodellen mit akuter und chronischer Entzündung zu bewerten, wurden Ratten-Carrageenan (CGN)-induzierte Pfotenödem- und Adjuvans-induzierte Arthritis(AIA)-Modelle verwendet.Kurz gesagt wurde 1 % CGN, gelöst in pyrogenfreier Kochsalzlösung (0,05 ml), in die rechte Hinterpfote von Ratten für den Pfotenödemtest injiziert.Nach 5 Stunden wurde die Schwellung der behandelten Krallen mit einem Plethysmographen gemessen.In 0,5 % CMC gelöstes Tanshinon I wurde 1 Stunde vor der CGN-Injektion oral verabreicht.Für den AIA-Test wurde eine arthritische Entzündung durch Injizieren von Mycobacterium lactis (0,6 ml/Ratte), gelöst in Mineralöl, in die rechte Hinterpfote von Ratten induziert.Tanshinone I wurde jeden Tag oral verabreicht.Die Dehnung von behandelten und unbehandelten Krallen wurde mit einem Plethysmographen gemessen.

Verweise:[1] Kim SY, et al.Wirkungen von aus Salvia miltiorrhiza bunge isoliertem Tanshinon I auf den Arachidonsäurestoffwechsel und in vivo-Entzündungsreaktionen.Phytother-Res.November 2002;16(7):616-20.